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郝慧鑫:Western Blot操作
郝慧鑫:Western Blot操作
- 视频
- 广东医群科技有限公司
- 2015-09-09 12:12:05
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本视频主要介绍了利用Western Blot方法检测不同组织或细胞蛋白表达量的方法。Western Blot主要通过SDS-PAGE凝胶电泳将不同分子量的蛋白分开,并通过电转仪将蛋白转移到固相载体膜上(NV/PVDF膜)。利用5%的BSA或5%的脱脂奶粉将膜封闭,结束后加入特异性一抗与目的蛋白结合,一抗孵育结束后再加入与一抗匹配的特异二抗与之结合,最后将底物发光试剂ECL/ECL PLUS均匀涂于膜上,暗室曝光,用胶片压片曝光或利用GENE GENOME曝光,最后通过目的条带的灰度与内参灰度的比值来判断表
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