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使用RIP-Chip从细胞提取物中分离鉴定mRNAs、microRNAs等组分

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  • 使用RIP-Chip从细胞提取物中分离鉴定mRNAs、microRNAs等组分

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  • 生命科学-分子技术
  • S-a-n-d-y
  • 2015-02-10 14:59:06
  • 转录后调控影响mRNA的定位、稳定性,然后RNA结合蛋白与靶mRNA形成核糖核蛋白(RNP)复合物。从细胞提取物的RNP复合物中确定这些未知的从头合成的靶mRNA,对理解RBP和其相关的蛋白质产生的机制和功能至关重要。该协议使用的方法被称为RNP免疫沉淀芯片(RIP-Chip),这种方法可以鉴定与核糖核蛋白复合物相关联的特定mRNA。有了这个重要的实验工具,研究人员能够探索与转录后基因调控,以及其他核蛋白的相互作用的复杂机制。 实验步骤包括:富集RNP复合物;准备分离的材料;免疫沉淀;Dnase和蛋白酶
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